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μ-Slide 15 Well 3D

　　你可以用 μ-Slide 15 Well 3D做更多實驗應(yīng)用，而不僅僅是血管生成和管形成的分析。

　　   * 沒有凝膠彎液面形成，出色細(xì)胞可視化，所有細(xì)胞都在一個焦平面上。

　　  * 適用于各種凝膠（例如 Matrigel®、膠原蛋白和瓊脂糖）的 3D 細(xì)胞培養(yǎng)。

　　  * 為實驗節(jié)約成本，每孔僅需要10 μl 凝膠。

　　一、聚焦每個細(xì)胞：μ-Slide 15 Well 3D 的原理

　　μ-Slide 15 Well 3D 具有專門的設(shè)計規(guī)格形狀，可輕松、方便且可重復(fù)地進(jìn)行管形成分析。它也是發(fā)芽測定、免疫熒光染色和一般 3D 細(xì)胞培養(yǎng)的理想選擇。

　　在將凝膠加入內(nèi)孔并給予時間凝固后，可以將細(xì)胞接種在其頂部以進(jìn)行管形成分析。由于采用了“孔中孔”技術(shù)，所需的凝膠量減少到每孔僅 10 μl，是常規(guī)多孔板用量的 10%。

　　此外，沒有形成凝膠彎液面。這確保了所有細(xì)胞都在一個光學(xué)平面上的均勻厚凝膠基質(zhì)的形成，創(chuàng)造了可重復(fù)的細(xì)胞培養(yǎng)條件。μ-Slide 15 Well 3D 可與所有常見的水凝膠基質(zhì)一起使用，例如 Matrigel®、膠原凝膠、瓊脂糖凝膠和透明質(zhì)酸凝膠。

　　μ-Slide 15 Well 3D 具有 15 個孔，專為低通量測定而設(shè)計。對于大規(guī)模應(yīng)用，ibidi 提供 μ-Plate 96 Well 3D。

　　圖片中μ-Slide 15 Well 3D采用了“孔中孔”嵌套式技術(shù)，每孔僅 10 μl凝膠，沒有形成凝膠彎液面

　　二、μ-Slide 15 Well 3D 應(yīng)用廣泛

　　1、管形成試驗或血管生成試驗：

　　對于管形成測定 （也稱為血管生成測定），將內(nèi)皮細(xì)胞接種在 10 μl 凝膠層（基底膜樣表面）的頂部，在那里它們形成毛細(xì)管樣結(jié)構(gòu)。通常使用Matrigel® 。細(xì)胞的管形成能力可用于分析各種藥物的促血管生成或抗血管生成潛力。

　　2、3D 細(xì)胞培養(yǎng)：

　　在許多情況下，3D 環(huán)境比 2D 細(xì)胞培養(yǎng)更接近于體內(nèi)情況。μ-Slide 15 Well 3D 是一種簡單且經(jīng)濟(jì)高效的解決方案，用于培養(yǎng)和顯微鏡檢查嵌入凝膠基質(zhì)中的細(xì)胞。凝膠層直接連接到上面的介質(zhì)儲存器，可以通過擴散快速輕松地進(jìn)行介質(zhì)交換。

　　除了只有一種細(xì)胞類型的培養(yǎng)物外，還可以在共培養(yǎng)實驗中研究不同細(xì)胞類型（例如癌細(xì)胞和成纖維細(xì)胞）的侵襲行為。

　　或者，可以使用相同或不同的 3D 凝膠基質(zhì)（例如基質(zhì)膠或膠原蛋白）創(chuàng)建夾心培養(yǎng)物。

　　此外，可以固定非粘附細(xì)胞，如血細(xì)胞或細(xì)菌，以增強顯微鏡檢查。

細(xì)胞嵌入3D凝膠基質(zhì)中

3D細(xì)胞共培養(yǎng)

球體實驗

　　3、免疫熒光染色:

　　為了分析管形成或 3D 培養(yǎng)實驗的結(jié)果，可以在 μ-Slide 15 Well 3D 中進(jìn)行免疫熒光染色。細(xì)胞可以直接在凝膠上或凝膠中固定和染色，然后使用高分辨率顯微鏡成像。

　　在 ibidi μ-Slide 15 Well 3D 中培養(yǎng)的成纖維細(xì)胞的遷移測定。左側(cè)的細(xì)胞分裂并聚合肌動蛋白（綠色）以形成指示遷移方向的前沿。EdU 表示增殖細(xì)胞（紅色）。細(xì)胞核被 DAPI（藍(lán)色）染色。該圖像是使用配備 Airyscan 檢測器的 Zeiss LSM 880 共聚焦顯微鏡獲取的。圖片由意大利的里雅斯特國際基因工程和生物技術(shù)中心 (ICGEB) 心血管生物學(xué)組的 Ambra Cappelletto 和 Andrea Colliva 提供。

　　小鼠胚胎背根神經(jīng)節(jié)，在 ibidi µ-Slide 15 Well 3D 中培養(yǎng)，針對 β III 微管蛋白染色。使用配備 IN Cell Investigator 軟件（GE Healthcare，英國）的 IN Cell Analyzer 2000 在 i3S BioSciences Screening Unit 獲得的圖像。圖片由 Estrella Do Céu Neto 提供，i3S - Instituto de Investigação e Inovação em Saúde / INEB-Instituto de Engenharia Biomédica，波爾圖大學(xué)，波爾圖，葡萄牙。

　　4、Focusing Cells聚焦細(xì)胞

　　當(dāng)使用少于10μl的凝膠填充μ-Slide 15 well 3D的內(nèi)孔時，可以培養(yǎng)少量細(xì)胞并將其聚焦在柔軟的凝膠表面上。

　　5、Low Volume Microscopy Chamber低容量腔室顯微鏡檢

　　μ-Slide 15 Well 3D也可以用作不含任何凝膠的腔室顯微鏡檢，這對于需要幾個微體積孔的實驗非常實用。

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